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使用蛋白分离器净化是保持水族箱内水质的主要策略。除水族箱本身的消费外，蛋白分离器是最昂贵的，几乎占所有设备总价值的绝大部分。由于其在水质净化中不可替代的作用和高昂的价格，蛋白分离器制造商们竭尽全力的宣传，怂恿鱼友购买。到底有多少鱼友能拒绝这样的广告:
Precision Marine:
"这些蛋白分离器能够撇除水族箱的任何物质。" "我们的蛋分能迅速分离系统内高速循环水流中的有机物质。"

AETech (ETSS):
"本品将为您提供独特的可操控性，请区别于其它产品。为您的水族箱柔和而高效的撇除杂质，而不会出现过度撇除现象。该分离器内能够产生最佳体积的气泡，使分离器内充满气泡的海水呈现出如牛奶般的乳白色。气泡与海水达到最长时间接触，减少无效泡沫。"

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Euroreef:
"自选泵头， "Euro-AirTM" venturis, 与 "Euro-WheelTM" pinwheel style impellers 组合能够产生难以置信的微气泡，形成气体与水中有机分子的最大接触面，保持水族箱清洁健康。" "超高的工作效率和更低的价格来源于先进的设计"

这些广告词是有代表性的几个，而且不是孤立存在的，但留下了一些问题:

它们的效率果真如宣传所描述的那么神奇吗?

蛋白分离器制造商是如何分析测试产品的工作效率呢?

目前是否有公认的蛋白分离器工作效率评判标准?

当我们讨论蛋白分离器时，它的工作效率的准确定义又是什么?

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在接下来的文章里，我们将详细讨论上述问题，介绍蛋白分离器工作效率的准确定义，该定义着重考虑海水中有机物质的撇除速率以及撇出物质的总量。 然后我们将会在模型系统上进行一个实验程序，比较四种大品牌蛋白分离器技术参数。最后，模型系统将通过精确的水质参数曲线再现蛋分工作效率。我们希望这些建议能够为蛋分设计和制造者提供有用信息，依此改良蛋白分离器性能。不过，这个尝试可能给那些宣称是“最棒”的产品一个毫不客气地测试结果。

1、什么是蛋白撇除？         
使用蛋白分离器净化水质的基本原理在鱼友中已经十分普及了，这里简单说明，不做过细讨论。总体上来说，撇除原理是向容器内通入气泡，在气泡上吸附了有机物质和其它杂质后使用物理方法去除气泡。气泡注入以及气泡与海水混合直至最终分离可以有很多方法。方法上的不同最终导致了制造商所宣称的效果不同。气泡本身是关键因素，因为它们能够为有机分子提供一个空气-水的多重介质交互表面，某些有机分子可以吸附在其表面。事实上，并不是所有的有机分子都具有这样的吸附特性的，只有那些具有亲水和排水双重特性的分子才能牢牢地吸附在气泡表面。具有完全亲水特性的蛋白质分子仍然留在海水中，完全排水的蛋白质被排斥在海水外，转移到气泡内充满气体的空间中。图1是一般蛋白分离器的示意图。海水通过水泵由水族箱内抽入，在输入蛋分前注入小气泡，气泡在上升过程中吸附有机分子，蛋分内与气泡分离的海水由下面的孔流回水族箱，水中的部分有机分子被排除。气泡在蛋分顶部聚集形成泡沫，不断向上涌出的泡沫最后都会流入废液收集杯中。泡沫中携带着大量的有机分子，去除这些泡沫的同时就完成了净化海水的过程。另外，还有一些溶解在水中的其它有机分子和水中的微生物也被排出系统。撇除过程并不会真正撇除所有原子、分子，完全溶解于水中的分子和亲水分子很难去除，如部分有机分子、盐、无机磷酸盐和碳酸盐等。

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图1.撇除效果示意图.

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最早文献记载的使用泡沫法从水中去除有机分子的科学家是德国人Ostwald和Schutz。1960年，Huckstedt将此方法介绍到水族系统中。但是当时这种方法并没有受到广泛关注，直到1990年代，珊瑚饲养时代的带来，该方法才再次被人们重视。 另一种使用泡沫净化海水的技术是在1969年由Wallace介绍的。其中第一种方法后来发展出了两个分支，一是污水净化，二是蛋白提取。在水族箱内应用蛋白撇除技术维护系统是泡沫撇除技术在这一领域的重大突破，现代蛋白分离器技术也是在此基础上发展出来的。泡沫撇除技术在食品、制药业的特殊功效已被得到公认，尤其是从稀释的蛋白质溶液中分离或提取蛋白质的重要作用。本文中，我们仅探讨蛋白撇除在水族系统中地作用。在食品和制药业，撇除的作用在于收集溶解于水中的蛋白质，相反，蛋白分离技术在水族箱中是要去掉不利水质的溶解性蛋白。无论如何，程序都是一样的。很多专业小组研究针对不同溶液，不断优化提取技术。他们发现，这种技术在水族箱内也适用。研究人员努力研发如何测量气体流动速度(a) gas flow rate, (b)液体流动速度 liquid flow rate,和 (c)气泡体积影响在蛋白撇除效果中的变化


缩enrichment (E) 和重新提取 recovery (R)，浓缩 Enrichment (E) 的定义略有不同。有些人把浓缩比率定义为分离器撇除的泡沫中蛋白质含量 / 待处理水中蛋白质含量（图1）。另外一些人将此定义为分离器撇除泡沫中的蛋白质含量 / 被分离处理过的水肿蛋白质含量（图1）。两者数据相差不是本质性的，所以无所谓。另一个重要参数是重新提取率recovery (R)，即蛋白分离器分离出的蛋白质数量 / 经过蛋白分离器处理水体总蛋白含量。重新提取率 recovery R可以用提取率加时间的格式表示，例如90分钟提取50%。这两个参数是从两个不同方面进行测量，因此形成两个参数的反比特性。   


     
浓缩和重新提取在泡沫撇除统计中都有用武之地。干泡沫中含有少量的水份，这种描述正式浓缩的意思。 因此，排除的干泡沫量越大，从系统中排出的废物越多。相反，湿润泡沫中含有大量水分，排出速度更快。也就是说，携带着大量有机质的湿润泡沫能更快的去除水体中的废物。在这种情况下，最大的重新提取率应该导致最大的海水净化率。 进步一讨论，如果制造商分别使用不同的标准衡量，那么从浓缩和重新提取两个不同角度的比较就没有意义了。湿润泡沫内含有更多的盐分，因此会引起系统内盐分的缺失，需要向系统内补充盐分以固定水体比重。 缸内的总体盐度会有变化，因此经常会看到介于干湿之间的泡沫。

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在最终的分析中，任何可提高泡沫总撇除量的因素都是可以提高净化水质的参数。蛋白提纯研究关注于浓缩率，因为在食品和生物制药工业中，蛋白的纯度是至关重要的。因此该两行业宁可牺牲一些提取率，也绝不会降低提纯率。无论怎样，蛋白提纯技术中的重要经验同样也会为水族蛋白分离器提供帮助。 图表2，3，4是蛋白提纯的典型说明。在这个研究中，模型蛋白 Bovine Serum Albumin (BSA) 溶解在盐水中(~ 5.8 ppt of NaCl; compare saltwater ~ 35 ppt of all salts) ，循环通过一个蛋白分离器模型，并向模型内注入空气。对收集的泡沫进行蛋白凝结分析，分离器模型的进水和出水也将同时被分析。图表2说明在实验通气量不断变化时浓缩和重新提取是如何区别表现的。高速通气量会降低浓缩率，而提高提取率，至少在实验测试范围内是如此表现的。

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图表2.蛋白分离器工作效率与气体通量关系(from Brown, 1990)

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图表2.蛋白分离器工作效率与气体通量关系(from Brown, 1990).         
关于这方面的综合性规律探索还不多，只有一条规律被人们掌握。关键在气泡的体积，直接影响着吸收模型蛋白的数量和最终形成泡沫的数量。不同环境有许多不同特性影响着浓缩和提取效率， 有些特性恰恰起到相反的作用。因此，有些参数的变化直接影响最终的效果。尤其是：


气泡表面积是个决定性因素，因为那里是蛋白吸附现象发生的地方。气体量相同的前提下，气泡越小，吸附表面积越大。在反映容器中，气泡接近球形，表面积A=6/直径。在排出的泡沫中，气泡大致呈12面体状态，与其相邻的6个气泡共用一个表面，因此，表面积为A=6.6/气泡直径。因此，在液体环境中，通气量相同情况下，小气泡工作效率更高。能够明显提升浓缩和提取效率。

泡沫中携带的液体向反应器内回流。由于许多复杂原因，气泡越大，液体回流现象越明显。一般，这种情况有助于增加浓缩率，因为回流液体内的蛋白浓度较低，泡沫内剩余液体内蛋白浓度较高，从而提高浓缩效果。所以，在形成泡沫阶段，泡沫气泡越大，浓缩率越高。  

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但什么是影响气泡体积的因素呢？         气体通量和气泡体积的比例之间有着比较复杂的关系，同时也受到气泡产生方式的影响。 据介绍，气体通量速度加快可以产生更小的气泡，直径在4-10 μM之间。在BROWN的实验条件下，随着气泡与气体通量比率，从较大气泡形成泡沫的回流量呈现优于较小气泡形成泡沫的效果，图表2所显示。 事实上，较慢的气体通入速度，会导致泡沫中气泡较大，泡沫中气泡越大，液体回流就越多，浓缩效率越高。 因此，图表2解释浓缩效果与通量的关系。当然，在另一个极端，更快的气体通量带走更多的液体进入泡沫，这种稀释的蛋白质含量相对较低的液体形成泡沫，浓缩率就比较低。         提取率与气体通量的比率是完全不同的情况，在这个例子中，气体通入速率越高，气泡就越小，泡沫中的回流现象就越不明显，提取率随之提高了。  如图表2中所示，泡沫中溶解的蛋白质就是在反应器中附着在气泡表面的蛋白质，任何减少液体回流的情况都能帮助泡沫中留住更多的蛋白质，从而提高撇出泡沫中蛋白的提取率。为提高这种效果，我们要就需要增加气体通入速率。最后的结论是慢速通入气体产生的较大体积的气泡所形成的泡沫液体回流较多，因此也就降低的提取率。

在一系列单独的实验中，Brown还发现增加蛋白分离器内液体流经的速度会导致提取率的降低，但只有在速率非常低的时候，浓缩率才会有明显的正比变化，见图表3。 当然，实验模型中水流速度要比水族箱中蛋白分离器水流速度低很多，甚至不在一个数量级上，但实验中使用的蛋白分离器模型反映仓也非常小，大约只有卷状卫生纸盒大小。这个结论将在下面被证实。